SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶(jiāo )电泳,是生物化学和(hé )分子生物(😛)学实验中常用的蛋白质分离和鉴定技术,这项技术的基本原理是利用蛋白质在电(diàn )场(chǎng )中的迁移率(lǜ )与其(qí )分子量成反比(⛓)的关系(xì ),通过添加阴离子洗涤剂(jì )SDS(十(🎎)二烷基硫酸钠)使(shǐ )蛋白(🚇)质(🚦)(zhì )带上负电荷,从而消(🌛)除了蛋白质原有的电荷差(🔃)异,使得蛋白质的迁移仅受其大小的影响。
操作步骤方面,首先需要制备适当浓度和pH值的聚(📣)丙烯(xī )酰胺凝(níng )胶,然(🐔)(rán )后将含(🌒)有SDS和还原剂的(de )蛋白质样品(pǐn )加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始根据大小(🎱)分离(lí ),小分子(zǐ )蛋白(bái )质移动得更快,而大分子蛋(dà(💵)n )白质(zhì )则(zé )较(🏓)慢,通(tōng )过染色或西(🌔)方印迹等方法可以检测和分析蛋(🚺)白质(zhì(🔉) )。
应用(🅿)范围广(guǎng )泛,SDS-PAGE不仅(jǐn )用于蛋白质分子量(liàng )的测定,还广泛应(yīng )用于蛋(🐀)白质纯化程度的分析、蛋白质(zhì )变性和复(fù )性研(yán )究以及蛋白质-蛋白质相互作用的研究,它也是研究蛋白(bái )质翻译后修(xiū )饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的(de )分析工具,但它也有局限(🥖)性,对于(yú )极端大小的蛋(🚩)(dàn )白质,分(fè(✋)n )辨(biàn )率可能会降低;某些蛋白质可能因为结构的(🤞)特殊(🌪)性而在凝胶中的迁(qiān )移不符合预期,在进(🤠)行SDS-PAGE分析时,通常需要(yào )结合其他生化和分子生(shēng )物学技术以获得(🍨)更准确的结果。
视频本站于2024-11-01 07:11:44收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。