SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶(jiāo )电泳,即聚丙(🌐)烯(xī )酰胺(🐵)凝(níng )胶电泳(yǒng ),是(shì )生物化学和分(🧟)子生物学实验中常用的蛋白(bái )质分离和鉴定技术,这项(xiàng )技术的基本原理是(🤦)利用蛋白质在电场中的迁移率与(yǔ )其分子量成反比的关系,通过(😨)添加(🍳)阴离子洗涤剂(jì )SDS(十二烷基硫酸钠)使蛋白质带(💴)上负电荷,从而消除了(le )蛋白质原有的电荷差异(yì ),使得(dé )蛋白质的迁移仅受其大小的(⏱)影响(xiǎ(🥇)ng )。
操作步骤方面,首(🔉)先需要制(zhì )备(bèi )适当(💕)浓度和pH值(zhí )的聚丙烯酰胺凝胶,然(rán )后将含有SDS和还原剂的蛋(🔬)(dàn )白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始(shǐ )根据大小分离,小分子蛋白质移动得更(🥫)快,而大分子蛋白质则较慢,通过染色或西方印迹等方法可(kě )以检测(👟)和分析(🔽)蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的测定,还广泛(fàn )应用于蛋白质纯化(huà )程度的分析、蛋(dàn )白质变性和复性研(🍒)究以(yǐ )及(jí )蛋白质-蛋白质相(xiàng )互作用的(de )研究,它也是研究蛋白(🤨)质(zhì )翻译后修(🌬)饰的重(chóng )要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的分析工(gōng )具,但它也有局限性,对于(🔙)极端大小(💯)(xiǎo )的蛋(dàn )白质,分辨率可能会降(🌐)低;某些(xiē )蛋(dàn )白质(zhì )可能(🚶)因为结构的特殊性而在凝(níng )胶中的迁移不符合预期,在进行SDS-PAGE分(fèn )析时(shí ),通常(🐝)(cháng )需要结合其他生化和分子生物学技术以获得(dé )更准确的结果。
视频本站于2024-10-23 10:10:16收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。