SDS-PAGE凝(níng )胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳(yǒng ),即聚(jù )丙烯酰胺凝(🥐)胶电泳,是生(shēng )物化学和分子(zǐ )生物学实验中常用的蛋(dàn )白(🌿)质分(fèn )离和鉴定技术,这项技术的基本原理是利(lì )用蛋白质在电场中的迁移率(lǜ )与其分子(zǐ )量成反(fǎn )比的(de )关系,通过添加阴离子(⏩)洗涤剂SDS(十二烷基(jī )硫酸钠)使蛋(dàn )白质带上(🐧)负电荷,从(🤤)而消(xiāo )除了(le )蛋白质原有的电荷差异,使得蛋白质的迁移仅受其大小的影响。
操作步(🌬)骤方面,首先需要制备适当浓度和pH值的聚丙烯酰胺(à(🛥)n )凝胶,然后将含有(yǒu )SDS和还(🎶)原剂(jì )的(de )蛋白质样品加入凝胶孔中(zhōng ),通电后,蛋白质开始根据大小分离,小分子(💉)蛋(dàn )白质移动得更快,而大分子蛋白质则较慢,通过染色(🙄)或西方印迹等方法可以检测和分析(xī )蛋白质。
应用范围广(guǎng )泛,SDS-PAGE不仅用于(yú )蛋白质分子(zǐ )量的测定,还广泛(🔞)应用于蛋白质纯化程度的(de )分析、蛋白(bá(🍥)i )质(zhì )变性和复性研究以及蛋白质-蛋(🛅)(dàn )白质(zhì )相互作用的研究(💿)(jiū ),它(💀)也是研究蛋白质翻译后修饰的(de )重要工具。
尽管SDS-PAGE是(shì )一种强大的分析工具,但它也有局限性,对于极端大小的蛋白质,分辨率可能会降(jiàng )低;某些蛋(dàn )白质可(🍅)能(🐴)因为结构的特殊性而在(🕟)凝胶中的迁移不符合(hé )预期,在进行SDS-PAGE分析时,通常需要结合其(qí )他生化(huà )和(hé )分子生物学技术以获(huò )得更准确的结果。
视频本站于2024-10-27 10:10:16收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。