SDS-PAGE凝(níng )胶电泳(🧤)技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙(🔉)烯酰胺凝胶电泳,是生(shēng )物化学和分(fèn )子生物学(xué )实验中(zhōng )常用的蛋(dàn )白质分(fèn )离和鉴定技(⏳)术,这(🈲)项(xiàng )技(jì )术的基本原理是利用蛋白质在电(🌽)场(chǎng )中的迁(qiān )移率(lǜ )与其(qí )分子量成反比的关系,通过添加阴离子洗涤剂SDS(十二烷基硫酸钠)使蛋白质带上负电荷,从(cóng )而消(xiāo )除(chú )了蛋白质原有的电荷差异,使得蛋(dàn )白质的迁移仅受其大小(🌬)的影响(xiǎng )。
操作步骤方面,首先(xiān )需要制备适当(🐔)浓度和pH值的聚丙烯酰胺凝胶,然后将含有SDS和还(hái )原剂的蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后(hòu ),蛋白质开始根(gēn )据(jù )大小分离,小分(fèn )子蛋(dàn )白(🛴)质移动得更快,而大分子蛋白(🤰)质则较慢,通(🦗)过染(🗽)色或(huò )西方印迹等方(⏩)法可以检测和分析蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量(⌛)的测定(dìng ),还广泛应用于蛋白质纯(chún )化程度的分析、蛋白质变性(🦆)(xìng )和(👝)复性研究以(🐸)及蛋白(bái )质-蛋白质相互作用的研究,它也是研究蛋白质翻译后修饰的(de )重要工具(jù )。
尽管SDS-PAGE是一种(zhǒng )强大的分析工具,但它也有局限性,对于(🚱)极(🚫)端大小的蛋白质,分辨率(🦒)可能会降低(dī );某些蛋白(bái )质可能(🍚)因(yīn )为结(jié )构的(🔢)特殊性而在凝胶中的迁移不符合预期,在进行SDS-PAGE分(fè(📟)n )析时,通常需要结合其他生化和分(fèn )子生物学技(jì )术(shù )以(yǐ )获(huò )得更准确的结果。
视频本站于2024-10-28 09:10:45收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。