SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳(yǒng ),即聚丙烯酰胺凝(☕)胶(jiāo )电泳,是生物化学和分子(zǐ )生物学实验中常用的(🛷)蛋白质分(fèn )离和鉴定技术,这项技术的基本原理是利用蛋白质在电场中的迁移(💾)率(lǜ )与其分子量成反比(bǐ )的关系,通过添加阴离子洗涤剂SDS(十二烷基硫酸钠)使蛋白质带上负电荷,从(👃)而消除了蛋(dàn )白质原有的(🏯)电荷差异,使(🗻)得蛋白质的迁移仅受(shòu )其大小的影响。
操作(zuò )步骤(🤵)方面,首先(xiān )需(🚾)要制(🔔)备适当(🛫)浓度和pH值的聚(jù )丙烯酰胺凝胶,然后将含有SDS和还原剂的蛋(🤔)白(🥊)(bái )质样品加入(rù )凝胶(jiāo )孔中,通电后,蛋白质开始(shǐ )根据大(dà )小(xiǎo )分(🛌)离,小分(fèn )子蛋白(bái )质移动得更快,而(🖕)(ér )大分子蛋白质则较慢(màn ),通过染色或西方印迹等方法(fǎ )可以检(🖐)测和分析蛋白质。
应用范(🙈)围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋(👇)白质分子量的测定,还(hái )广泛应用于蛋白质纯化程度的分析、蛋(dàn )白质变性和复性研(yán )究以及(jí )蛋(dàn )白质-蛋白质(zhì )相互作用的研究,它也是研究(💻)蛋白质(zhì )翻译后修饰的(de )重要工具。
尽(jìn )管SDS-PAGE是(shì )一(yī )种强大的(de )分析工(gōng )具,但它也有局限性,对于极(jí )端大小的蛋白质(zhì ),分辨率可(kě )能会降低;某些蛋白(🦄)质可能因为结构的(❓)特殊性而在(zài )凝胶中的迁(🦔)移不符合(❤)(hé )预期,在进行(🕒)SDS-PAGE分析时,通(tōng )常需要结合其他生化和分(fèn )子生物(wù )学技术以获得更准确(què )的结果。
视频本站于2024-11-07 02:11:15收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。