SDS-PAGE凝胶电泳技(jì )术(🙀)
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙(bǐng )烯酰胺凝胶(jiāo )电泳,是生物化学和分子生物学实验中常用的蛋白(🤰)质分离和鉴定技术,这项技术(🌸)的基本(běn )原理是利(📴)(lì )用蛋白质(Ⓜ)在电场中的迁移率与(yǔ )其分子量成反比的关(guān )系,通过添加阴(yīn )离子洗涤剂SDS(十二(💍)烷基硫酸钠)使蛋白质带上(⏯)负电荷,从而(ér )消除了蛋白质原(yuán )有的电荷(hé )差异(🌄),使得蛋白质的迁移仅受其大小的(📹)(de )影(yǐ(👤)ng )响。
操作步骤(🥟)方(🐋)面,首先需要制备适(shì )当浓度和pH值的聚丙烯酰胺凝胶,然(rán )后将含有(🦋)SDS和还原剂的(de )蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始(shǐ )根据大小分离,小分子蛋白(bái )质移动得更快(kuài ),而大(🏞)分子蛋白质则较(jiào )慢,通过染色或西方印迹等方(fā(🏬)ng )法可以(yǐ )检(jiǎn )测和分析蛋白质。
应用(yòng )范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的测定,还(hái )广(guǎng )泛应(yīng )用于蛋白(bái )质纯化程度的分(🥕)析、蛋白质(zhì )变(biàn )性和(🏥)(hé )复性(xìng )研(yán )究以及蛋白质-蛋白质相互作用的研究,它也是研究蛋白质翻(fān )译后修饰(🔏)的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种(🔡)强大的分析工具,但它也有局限性,对(duì )于极端大小的蛋白质(zhì ),分(🔯)辨率(lǜ )可能会(✡)降低;某些蛋白质可能因为结构的特殊性而在凝胶中的迁移不(bú )符合预期,在进(🤫)行SDS-PAGE分析时,通(📹)常需要结合其(qí )他生(🤾)化和分子生物(wù )学(🏟)技术(shù )以获(huò )得更准(zhǔn )确的结果。
视频本站于2024-11-05 10:11:05收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。